Test di catalasi sui batteri per scoprire la loro capacità di degradare il perossido di idrogeno (con figura)

Test di catalasi sui batteri per scoprire la loro capacità di degradare il perossido di idrogeno (con figura)!

Principio:

Alcuni batteri hanno la capacità di degradare il perossido di idrogeno (H 2 0 2 ) in acqua (H 2 O) e ossigeno (0, ↑), poiché possono produrre l'enzima "catalasi".

La rottura del perossido di idrogeno mediante catalasi è indicata da bolle di gas ossigeno libero (0, ↑).

Nel test della catalasi, un loop dei batteri test viene immesso in una goccia di perossido di idrogeno prelevata su un vetrino. Se il batterio ha la capacità di produrre catalasi, rompe il perossido di idrogeno (H 2 O 2 ) in acqua e ossigeno. La produzione di ossigeno risulta in gorgogliamento o schiuma, che può essere notato nella goccia.

Materiali richiesti:

Diapositive, carta bibula, ansa da inoculo, becco Bunsen, camera a flusso laminare, perossido di idrogeno (3%), colonie isolate o colture pure di batteri.

Procedura:

1. Un vetrino viene pulito sotto l'acqua del rubinetto (Figura 7.18).

2. Il vetrino viene pulito con carta bibula e asciugato all'aria.

3. Una goccia di perossido di idrogeno (3%) viene prelevata al centro del vetrino.

4. Un cappio dei batteri di prova viene prelevato in modo asettico, preferibilmente in una camera a flusso laminare, con l'aiuto di un'ansa fiamma-sterilizzata e viene immesso nella goccia di perossido di idrogeno sul vetrino. Il ciclo è sterilizzato dopo ogni inoculazione.

osservazioni:

1. Nella goccia si verificano gorgogliamento o formazione di schiuma: Catalase positivo.

2. Non si verificano gorgogliamento o formazione di schiuma nella goccia: catalasi negativa.

Precauzioni:

Una coltura di batteri da terreno di agar sangue non può essere utilizzata per il test della catalasi, poiché il sangue contiene catalasi e dà sempre un risultato positivo. I batteri catalasi negativi tendono a morire nei mezzi senza zucchero perché producono H 2 0 2 o perché H 2 0 2 si accumula nel mezzo, quando sono esposti all'aria e alla luce.

Pertanto, le colture di tali batteri devono essere conservate al buio e dove l'accesso all'aria è limitato. La catalasi si trova in quasi tutti i batteri che possono crescere aerobicamente. Poiché l'enzima è prodotto solo da batteri vitali, le colture di età superiore a 24 ore non possono essere utilizzate per il test della catalasi.