Tecnica con anticorpi fluorescenti per la rilevazione di un particolare batterio in un campione
Leggi questo articolo per conoscere il Principio Fluorescenza-tecnica degli anticorpi per il rilevamento di un particolare batterio in un campione!
Scopo del principio di immunofluorescenza o tecnica di fluorescenza-anticorpo per il rilevamento di particolari batteri in un campione.
La tecnica di fluorescenza-anticorpo o immunofluorescenza è una procedura rapida e affidabile per l'individuazione di particolari batteri in un campione. Sono disponibili un certo numero di anticorpi, etichettati con coloranti fluorescenti, come fluoresceina isocianato o isotiocianato, ciascuno specifico per particolari batteri.
Uno di questi anticorpi marcati, specifici per i particolari batteri da rilevare, viene aggiunto in gocce a uno striscio fissato dal calore del campione sconosciuto di batteri su una diapositiva e distribuito delicatamente sulla superficie dello striscio. Una carta da filtro inumidita viene posta all'interno di una capsula di Petri.
Quindi, il vetrino viene posizionato al suo interno su un'asta di vetro a forma di U e incubato a 25 ° C per 35 minuti. L'anticorpo in eccesso sullo striscio viene lavato via con soluzione salina tamponata al fosfato all'1%. Il vetrino viene immerso in una vaschetta Coplin contenente soluzione salina tamponata all'1% a 25 ° C per 10 minuti. Il vetrino viene asciugato con carta bibula. Una goccia di glicerolo viene aggiunta allo striscio. È coperto con un vetrino coprioggetto ed esaminato con un microscopio a fluorescenza.
Se i batteri specifici dell'anticorpo marcato utilizzato sono presenti nel campione sconosciuto di batteri, si forma un complesso antigene-anticorpo (qui i batteri sono l'antigene). Poiché l'anticorpo è marcato con una sostanza fluorescente, il complesso antigene-anticorpo emette fluorescenza, quando osservato al microscopio a fluorescenza. Se i batteri specifici dell'anticorpo sono assenti, l'anticorpo fluorescente viene lavato via e la fluorescenza non viene osservata.
